Nucleopolyhedrovirus: scanning electron microscopy technique

A simplified methodology was developed to study the geometric form of multiple Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus by scanning electron microscopy. The virus belongs to Baculoviridae family and was isolated from the silkworm Bombyx mori (L.) (Lepidoptera: Bombycidae). The polyhedra of Nucleopolyhedrovirus were obtained from the filtrate, inoculum and hemolymph of the silkworm experimentally infected with nuclear polyhedra. This material was placed on stubs, where a copper tape was previously adhered. After dry at room temperature the virus was covered with carbon and gold. Scanning electron microscopy analysis reveled a well defined morphology for the polyhedra of multiple Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus, making possible the mathematical study that identified it as a truncated octahedron. The form of the polyhedron can present taxonomic value, once it is specific for each viral lineage.

Um método simples foi desenvolvido para se estudar a forma geométrica do Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus múltiplo, BmMNPV, para microscopia eletrônica de varredura. O vírus, pertencente à Família Baculoviridae, foi obtido do filtrado, do inóculo e da hemolinfa de lagartas de Bombyx mori (L.) (Lepidoptera: Bombycidae) infectadas. O material foi colocado diretamente sobre o suporte de varredura, onde previamente foi aderida uma fita de cobre. Após secagem e metalização com carbono e ouro, o vírus foi analisado ao microscópio de varredura. Os poliedros apresentaram-se com as faces lisas, perfeitamente definidas, possibilitando a análise matemática que o identificou como um octaedro truncado. A forma do poliedro pode apresentar valor taxonômico, uma vez que ela é específica para cada linhagem viral.

Nucleopolyhedrovirus infected central nervous system cells of Bombyx mori ( L. ) ( Lepidoptera: Bombycidae )

O Nucleopolyhedrovirus é um vírus que infecta uma série de insetos, como o bicho-da-seda, Bombyx mori (L.). Um isolado geográfico do vírus, o Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus múltiplo (BmMNPV), foi utilizado para se analisar a citopatologia em células do sistema nervoso central (SNC) de lagartas de B. mori. O BmMNPV foi inoculado experimentalmente e segmentos do tecido nervoso foram processados para microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão. Células do SNC (nervosas, gliais e do perineuro) revelaram indícios de infecção no 5° dia pós-inoculação com o BmMNPV, cujas características citopatológicas foram: hipertrofia nuclear, presença do estroma virogênico, onde são sintetizados os virions, e formação dos poliedros. Não foi observada lise das células do SNC infectadas, uma característica das infecções pelo NPV; contudo, poliedros maduros foram evidenciados em espaços nos gânglios e conectivos nervosos. Esses poliedros possivelmente são oriundos das traquéias que penetram no sistema nervoso, e suas células, susceptíveis ao BmMNPV, sofrem lise após infecção. Os resultados indicam, ainda, que o sistema traqueal é responsável pela dispersão da infecção causada pelo BmMNPV no SNC de lagartas de B. mori. Neste sentido, os ramos que formam o sistema traqueal possibilitam o rompimento da barreira hemolinfa/sistema nervoso, permitindo que os virions tenham acesso 'a matriz extracelular do SNC e, conseqüentemente, às suas células constituintes.